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　　微生物無菌檢測用于檢查在測試條件下測試產(chǎn)品中是否存在特定微生物。用該方法檢查非無菌制劑及其原輔材料是否符合相應(yīng)的微生物*時(shí)，應(yīng)按照以下規(guī)定進(jìn)行檢查，包括樣品取樣量和結(jié)果判斷。該檢查方法可以使用其他微生物檢查方法，包括自動(dòng)檢查方法，但必須證明該替代方法等效于藥典規(guī)定的檢查方法。

　　在微生物無菌檢測中，如果測試產(chǎn)品具有抗菌活性，應(yīng)盡可能將其去除或中和。檢查測試產(chǎn)品時(shí)，如果使用中和劑或滅活劑，應(yīng)確認(rèn)其對微生物的有效性和無毒性。如果在制備測試溶液時(shí)使用表面活性劑，則應(yīng)確認(rèn)它對微生物無毒且與所用的中和劑或滅活劑兼容。應(yīng)檢查用于測試物品的對照細(xì)菌測試的培養(yǎng)基的適用性。應(yīng)測試測試產(chǎn)品的對照細(xì)菌檢查方法的方法適用性，以確認(rèn)所使用的方法適用于產(chǎn)品的對照細(xì)菌檢查。如果檢查程序或產(chǎn)品的更改可能影響檢查結(jié)果，則對照細(xì)菌的檢查方法應(yīng)重新進(jìn)行適用性試驗(yàn)。

　　1、菌株和細(xì)菌液體的制備

　　用于菌株測試的菌株的傳代次數(shù)不得超過5代（從菌株收集中心獲得的干菌株為第0代），并且適當(dāng)應(yīng)對菌株進(jìn)行保存以確保被測菌株的生物學(xué)特性。

　　細(xì)菌溶液的制備將金黃色葡萄球菌，銅綠假單胞菌，大腸桿菌和沙門氏菌分別接種于胰蛋白酶大豆蛋白liquid液體培養(yǎng)基或胰蛋白酶大豆蛋白ept瓊脂培養(yǎng)基上，于30?35℃培養(yǎng)18-24小時(shí)。將白念珠菌接種在Sabouraud的葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基或Sabouraud的葡萄糖液體培養(yǎng)基上，于20?25°C培養(yǎng)2至3天。接種產(chǎn)孢梭狀芽胞桿菌以富集梭狀芽孢桿菌。將培養(yǎng)基在30-35°C的厭氧條件下培養(yǎng)24-48小時(shí)，或在30-35°C的巰基乙酸鹽液體培養(yǎng)基中接種18-24小時(shí)。將上述培養(yǎng)物用pH7.0無菌氯化鈉-緩沖液或0.9％無菌氯化鈉溶液制成合適濃度的細(xì)菌懸浮液。

　　如果準(zhǔn)備后將細(xì)菌溶液保持在室溫下，應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)使用；如果儲存在2-8°C，則可以在24小時(shí)內(nèi)使用。產(chǎn)孢梭狀芽孢桿菌懸浮液可以代替新鮮的細(xì)菌懸浮液，穩(wěn)定的孢子懸浮液可以在2?8℃下保存，并在驗(yàn)證的保存期內(nèi)使用。

　　2、陰性對照

　　為了確認(rèn)微生物無菌檢測的條件是否符合要求，應(yīng)進(jìn)行陰性對照試驗(yàn)，并且陰性對照試驗(yàn)應(yīng)無菌生長。如果陰性對照有細(xì)菌生長，則應(yīng)進(jìn)行偏差調(diào)查。

　　3、培養(yǎng)基的適用性檢查

　　應(yīng)檢查對照細(xì)菌的終培養(yǎng)基，脫水培養(yǎng)基或根據(jù)處方制備的培養(yǎng)基的適用性。對照細(xì)菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查項(xiàng)目包括促進(jìn)生長能力，抑制能力和指示特性的檢查。